蘑菇在地球生物圈中广泛分布。蘑菇是蒽醌类、萜烯类、甾体类、苯甲酸衍生物等次生代谢物的最佳代谢物来源，以及含有少量蛋白质、肽和草酸的初级代谢物。蘑菇具有多种药理作用，包括抗菌、清除自由基、免疫调节、抗肿瘤、抗高胆固醇血症、保护心血管、抗真菌、抗糖尿病、保肝、抗寄生虫和解毒作用。

蛹虫草（Cordyceps militaris）是由子实体（草部分）和菌核（昆虫的尸体》组成的复合体，蛹虫草的子实体和菌丝体中存在不同的生物活性化合物，包括多糖、腺苷衍生物（主要是虫草素）、甘露醇、麦角甾醇、蛋白质和肽。C.militaria显示出多种治疗特性，包括抗炎和抗氧化特性，减少身体疲劳，有助于控制血糖和治疗慢性肾病，改善肝功能和提高身体机能，调节血压和提高体内氧饱和度，还具有抗肿瘤和抗衰老特性。

据悉，目前还没有文献报道用GC-MS和LC-MS对蛹虫草甲醇提取物进行解析，并用蛋白水解酶分离抗菌肽。本研究拟通过对蛹虫草甲醇粗提物极性的研究，对其生物活性成分进行鉴定和表征，并从蛹虫草中分离出蘑菇活性肽（MBAPs）。采用不同方案和不同菌株检测其生物代谢物和多肽的抑菌活性，分别采用DPPH、α-淀粉酶和BSA测定其抗氧化、抗糖尿病和抗炎作用，并通过SDS-PAGE进行鉴定。这项研究探讨了药用蘑菇的生物代谢物和抗菌肽，以消除微生物感染和其他疾病的风险。采用GC-MS定量化合物对非小细胞肺癌基因（NSCLC）进行计算分析，评价蛹虫草的生物代谢物。

使用 GCMS 分析共鉴定出 34 种化合物，占鉴定总检出成分的 100%，使用 LC-MS 鉴定出 20 种化合物，显示出较强的生物活性。FT-IR光谱显示出强大的瞬时峰，具有不同的生物活性成分，包括存在于蛹虫草甲醇提取物中的羧酸、酚类、胺和烷烃。在蛹虫草中，在 70% 浓度的蛋白质提取物中观察到较高的蛋白质浓度 （500 μg/ml ± 0.025）。甲醇提取物的最佳抗氧化活性 （% 自由基清除活性） 为 80a ± 0.03，抗糖尿病活性为 37 ± 0.057，抗炎活性为 40 ± 0.021，浓度为 12 mg/ml。不同浓度蛹虫草蛋白和甲醇提取物均具有显著的抑菌活性（p < 0.05）。吲哚嗪，2-（4-甲基苯基）具有最强的结合亲和力 （微摩尔级） 和优化的性能，可选择作为先导抑制剂。它与非小细胞肺癌基因的RET基因活性位点相互作用良好，具有神经保护和保肝作用。

图1.SDS-PAGE分析。（A） 蛹虫草蛋白的SDS-PAGE（B）Thermo Scientific TMPageRulerTM预染色蛋白阶梯大小（kDa）（C）虫草蛋白的蛋白酶解处理。

图2. 吲哚嗪、2-（4-甲基苯基）和RET的分子相互作用。

（A） DeepSite结合RET蛋白囊。活性残基由黄色箭头突出显示（B）氢键，显示对接复合物的三维图像（C）对接复合物三维图像，显示氨基酸和蛋白质配体相互作用的距离（D）吲哚嗪、2-（4-甲基苯基）-与RET基因复合物的最佳位置可视化。

SwissADME分析显示，吲哚嗪，2-（4-甲基苯基）-具有良好的亲脂性（Log p < 4 Log Po/w(2.90)），是抗非小细胞肺癌的最佳化合物。药代动力学分析表明，该药物具有良好的胃肠道吸收和水溶性，符合利平斯基定律。根据药代动力学分析和化合物相互作用显示糖蛋白通透性低，CYP2C9和CYP2C19无抑制作用。吲哚嗪，2-（4-甲基苯基）-对肝毒性、致癌性和免疫毒性的可预测性较低。致突变性和细胞毒性评分也很低且无活性。有很高的迹象表明，吲哚嗪，2-（4-甲基苯基）-不会致癌、致突变或具肝毒性。

本研究旨在分析蛹虫草的生物活性。该测试包括使用非酶测定的抗氧化活性，使用耐药和非耐药菌株的抗微生物活性。在生物活性方面，蛹虫草甲醇提取物表现出较强的抗氧化活性，虫草素等酚类化合物的抗氧化性能主要归功于其较强的供氢能力。因此，这些研究结果表明，蛹虫草是治疗各种疾病的良好候选者，特别是那些抗氧化应激是其发生机制之一的疾病。结果表明，吲哚嗪2-（4-甲基苯基）的结合亲和力（微摩尔）最高，性能最佳，可作为铅抑制剂。它与非小细胞肺癌RET基因的活性位点相互作用良好，具有神经保护和肝保护作用。因此，吲哚嗪，2-（4-甲基苯基）是治疗N型NSCLC的潜在RET基因抑制剂。综上所述，由于其所含的生物活性成分，蛹虫草具有良好的药理和药用潜力，值得进一步研究。

原文发表于：PLOS ONE 20(1): e0310103. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0310103